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    基于BME培養基所誕生的DMEM培養基

    發布時間:2021/8/11 16:25:45      閱讀次數:642

      DMEM培養基的誕生是在BME培養基基礎上,使氨基酸和維生素濃度均增加4倍,并額外補充非必需氨基酸(甘氨酸和絲氨酸)、檸檬酸鐵、丙酮酸等成分;葡萄糖濃度可提高至25mM(高糖),DMEM多用于哺乳動物貼壁細胞的培養。
      特點:
      -GMP級別,含有丙酮酸鈉和1000mg/L的葡萄糖;
      -用于多種哺乳動物貼壁培養,如:成纖維細胞、Hela、293等實體瘤細胞;
      -不含蛋白質、脂類和生長因子,需要添加胎牛血清或培養添加物后使用。
      -RPMI 1640培養基是專為淋巴樣細胞培養而設計的,(Roswell Park Medical Institute,RPMI)G.E. Moore在5A培養基基礎上,在維持無機鹽濃度和培養基滲透壓的前提下,主要對氨基酸、鈣和鎂濃度進行優化,開發出用于培養淋巴細胞的RPMI 1640培養基。
      DMEM培養基中各種組分的作用及添加依據:
      Hepes(羥乙基哌倩乙硫磺酸,238.3):25mM/L(5.9575g/L),不加碳酸氫鈉時pH為6.7±0.3,加碳酸氫鈉時pH為7.0±0.3。單獨配制時,配制為100X即0.6g/ml。配制2.5M/L(0.6g/mL)Hepes:12g的Hepes定容到20mlPBS中,過濾除菌,分裝為1ml/管,-20C保存。Cell Biology建議為4℃保存。
      HEPES是一種非離子緩沖液,在pH7.2-7.4范圍內具有較好的緩沖能力,但是非常昂貴,在高濃度時對一些細胞可能有毒.HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉(0.34g/L)共用,以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加,在這種培養條件下,細胞培養瓶的蓋子應擰緊,以防止培養液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。
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