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    語純生物(Nexell)小鼠血清的應用

    發布時間:2022/3/25 13:40:09      閱讀次數:287

     小鼠血清采用健康小鼠血液為原料,經無菌采集、分離、微孔過濾后而成,性狀為澄清液體,無噬菌體、低內毒素,無溶血無異物無細菌真菌支原體霉形體衣原體等,適用于試驗室或生化科研相關試驗,滿足不同科研實驗的多種需求。

    小鼠血清可用于1.動物免疫、血清IgG制備。2.病理組化封閉、ELISA等免疫實驗中的封閉及保護劑的使用。3.細胞體外培養相關實驗。

    小鼠血清來源于非免疫的小鼠宿主,經過脂質萃取和含NaN3PBS溶液透析,改善其透明度。在病理組化封閉中推薦用PBS將封閉血清原液稀釋5-20倍,配成5%-20%的工作液,直接滴加在組織切片或者細胞涂片上,37℃度孵育10-30分鐘,清除血清,勿洗,滴加適當比例稀釋的一抗工作液,37℃孵育1-2h4℃過夜。

    在細胞培養中培養細胞用的培養基為人工合成,但動物細胞生活的內環境還有一些成分尚未研究清楚,加入動物血清是為了給體外培養的細胞提供一個類似生物體內的環境,此外動物血清中也包含了一些動物的激素和酶,可以促進細胞的發育。主要作用有:

    1、提供基本營養物質或合成培養基所缺乏的營養物質:如氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等;

    2、提供有利于細胞生長增殖所需的激素、生長因子;

    3、提供貼壁細胞所需的貼壁因子和擴展因子;

    4、對培養中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用,使細胞免受蛋白酶的損傷;

    5、血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝解毒中起重要作用;

    6、血清中的結合蛋白還可消除某些毒素和金屬對細胞的毒性作用。

    應用[4][5]

    用于瑞香素對小鼠淋巴細胞免疫抑制效果及其作用機制的研究

    選用具有較低毒性和潛在免疫抑制活性的DAP進行后續免疫抑制作用的研究。研究旨在研究DAP對小鼠淋巴細胞的免疫抑制作用和基本機制。

    前期研究證明在體外,DAP能夠抑制ConALPS誘導的小鼠脾細胞的增殖反應,提示其對T淋巴細胞和B淋巴細胞的增殖反應有直接的抑制作用。細胞增殖主要是通過細胞周期調控的,細胞周期由不同的連續的階段(G0/G1,S,G2/M)組成。使用碘化丙啶染色法分析細胞周期分布情況,通過流式細胞術檢測發現,隨著DAP濃度的增加,處于G0/G1期的細胞數增加,處于S期和G2/M期的細胞數則減少,說明DAP是在G0/G1期阻斷DNA合成來抑制小鼠淋巴細胞有絲分裂和細胞過度增殖。細胞因子是免疫系統重要的調節劑和效應劑。

    尤其是多種促炎細胞因子已被證明與多種自身免疫性疾病有關。在本研究中,我們使用的ConA作為T細胞有絲分裂原,選擇Th1型細胞因子IL-2、IFN-γ和Th2細胞因子IL-4、IL-6用于檢測DAPTh1Th2細胞的影響。

    結果表明,DAP可以顯著抑制ConA誘導的小鼠脾細胞主要細胞因子分泌和mRNA的表達,提示其抑制細胞因子產生的作用環節在mRNA表達階段。這些研究表明,DAP的免疫抑制作用與抑制細胞因子的產生與分泌有關系。

    細胞內Ca2+是一種典型的細胞內信使,它的許多細胞效應是通過鈣調蛋白(CaM)轉導,Ca2+/CaM復合物調節多種下游目標包括蛋白質激酶和磷酸酶。

    其中,與免疫相關的最重要的兩條途徑是受CaM調節的CaN-NFAT途徑和CaMK-NF-κB途徑。

    參考文獻

    [1]Biochemical and biological studies on 2-desamino-2-methylaminopterin,an antifolate the polyglutamates of which are more potent than the monoglutamate against three key enzymes of folate metabolism.Rosowsky A,Galivan J,Beardsley G P,Bader H,OConnor B M,Russello O,Moroson B A,DeYarman M T,Kerwar S S,Freisheim J H.Cancer Research.1992

    [2]Suppressive effect of mizoribine on progression of bovine serum albumin nephritis in mice.Chen X M,Aozuka S,Kobayashi Y.Nihon Jinzo Gakkai shi.1987

    [3]Therapeutic potential of B and T lymphocyteattenuator expressed on CD8+T cells for contact hypersensitivity.Nakagomi D,Suzuki K,Hosokawa J,et al.Journal of Investigative Dermatology.2013

    [4]Dysregulated phosphorylation of Ca(2+)/calmodulin-dependent protein kinase II-αin the hippocampus of subjects with mild cognitive impairment and Alzheimers disease.Reese Lindsay C,Laezza Fernanda,Woltjer Randall,Taglialatela Giulio.Journal of Neurophysiology.2011

     

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