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    分析透析胎牛血清的生產工藝

    發布時間:2021/8/20 11:24:36      閱讀次數:518

       透析胎牛血清主要用于可能需要關注小分子濃度的特殊研究.這主要包括四個領域:蛋白質組學 同位素標記 細胞通訊以及報告基因細胞系的篩選,其中有些領域是相互交叉的.

      分析透析胎牛血清的生產工藝:
      a. 透析胎牛血清是在胎牛血清的基礎上進行加工的.
      胎牛血清在無菌條件下要經過0.1微米膜三重過濾,要進行一系列的檢測,包括理化性質檢查(如滲透壓和pH值),成分檢查(如內毒素和血紅蛋白) 外源因子檢查(如細菌 病毒和支原體)以及促進細胞增殖的檢查等.
      透析胎牛血清為保證其性能和安全性,也需具備胎牛血清的這些工藝和檢查.
      b. 透析胎牛血清,顧名思義,需經過透析.它是在4°C下用特定的透析膜對血清在0.15M NaCl中透析.由于該透析膜只允許10 kDa以下的小分子穿過,在滲透壓的作用下,這些小分子便從血清中滲析到透析膜外的NaCl溶液中.10 kDa以下的小分子有化學小分子 核苷酸 某些激素 鹽 低分子量蛋白質 氨基酸 細胞因子 葡萄糖 殘留抗生素和其他外源分子.那么透析的效果如何?以及透析到何時呢?由于不可能監測全部小分子,因此常選用葡萄糖為代表.血清中葡萄糖<5 mg/dL,即可以停止透析了.透析過程中,除監測葡萄糖濃度外(可采用葡萄糖氧化酶方法測定),還需仔細監測pH值和滲透壓.
      c. 該透析采用的是切向流過濾(tangential flow filtration).切向流是指液體流動方向與過濾方向呈垂直方向的過濾形式.該方式使液體流動在濾膜表面產生剪切力,減小了濾膜上的物質堆積,保證了穩定的過濾速度.
      透析胎牛血清對培養中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內皮細胞 骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用.這種作用是偶然發現的,現在則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用.因為胰蛋白酶已經被廣泛用于貼壁細胞的消化傳代.血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護細胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養攪拌時,粘度起到重要作用.血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝解毒中起重要作用,如SeO3,硒等.
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